酵素純化方法

章         章    名       (連結到下面目錄細節)

1   酵素純化實驗室  Enzyme Lab

2   蛋白質抽取  Protein Extraction

3   色層分析法  Chromatography

4   其它純化或分離方法  Other Purification Methods

5   純化策略  Purification Strategy

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1   酵素純化實驗室  Enzyme Lab

1.1

儀器  Instruments

1.2

小型器具及消耗品  Consumers

1.3

藥品  Reagents

1.4

個人用品  Personal Utilities

2   蛋白質抽取  Protein Extraction

2.1

如何開始？  How to Start?

2.2

材料來源  Materials

2.3

均質及抽取  Crude Extraction

2.4

鹽析及沉澱法  Precipitation Methods

2.4.1  鹽析分劃法

2.4.2  有機溶劑沉澱法

2.4.3  其它處理法

3   色層分析法  Chromatography

3.1

色層分析法原理  Introduction  

3.2

膠體過濾法  Gel Filtration

3.2.1  原理概述

3.2.2  膠体介質

3.2.3  膠体管柱

3.2.4  管柱操作

3.2.5  問題及解決

3.3

離子交換法  Ion Exchange

3.3.1  原理概述

3.3.2  離子交換介質

3.3.3  緩衝液與層析系統

3.3.4  管柱操作方法

3.3.5  色層焦集法

3.4

親和層析法  Affinity Chromatography

3.4.1  原理概述

3.4.2  親和吸著劑

3.4.3  金屬螯合層析法

3.4.4  疏水性層析法

3.4.5  液相分配

3.5

HPLC 及 FPLC    HPLC & FPLC

4   其它純化或分離方法  Other Methods

4.1

製備式電泳  Preparative Electrophoresis

4.2

超高速離心法  Ultracentrifuge

4.3

超微薄膜過濾法  Ultrafiltration

5   純化策略  Purification Strategy

5.1

純化步驟設計  Design Purification Steps

5.1.1  影響純化的因素

5.1.2  組合純化步驟

5.2

純化結果  Results of Purification

X   補充幻燈片  Slides

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酵素分析方法

章         章    名       (連結到下面目錄細節)

1   蛋白質定量法  Protein Determination

2   酵素活性測定法  Enzyme Analysis

3   電泳檢定法  Electrophoresis

4   分子量決定法  Molecular Weight Determination

5   蛋白質構造與組成分析  Protein Structure Analysis

6   免疫學工具的利用  Immunological Tools

7   蛋白質科技  Protein Technology

1   蛋白質定量法  Protein Determination

1.1

Biuret 法  Biuret Method

1.2

Lowry 法  Lowry Method 

1.3

UV 吸光法  UV Absorbance

1.4

Coomassie Blue (dye binding) 法

1.5

其它方法  Miscellaneous

2   酵素活性測定法  Enzyme Analysis

2.1

催化反應  Enzyme Catalytic Reaction

2.2

酵素活性分析  Enzyme Assay

2.2.1  酵素活性測定方法 

2.2.2  中止酵素反應方法

2.2.3  連續測定法

2.2.4  澱粉磷解脢活性分析

2.3

維持酵素活性  Enzyme Activity

2.3.1  緩衝液

2.3.2  試劑的保存

2.3.3  酵素活性之維持

2.3.4  酵素活性單位

3   電泳檢定法  Electrophoresis

3.1 

電泳原理  Introduction

3.1.1  蛋白質的泳動率

3.1.2  電泳的種類

3.1.3  電泳設備及系統選擇

3.2 

聚丙烯醯胺膠体電泳  PAGE

3.2.1  PAGE 種類

3.2.2  PAGE 膠体的組成

3.2.2.1  膠體主要成分

3.2.2.2  鑄膠反應

3.2.3  PAGE 系統解剖

3.2.3.1  電泳系統的組成

3.2.3.2  電泳的焦集作用

3.2.3.3  兩種電泳系統比較

3.3 

其它相關技術  Other Techniques

3.3.1  染色及乾燥

3.3.2  等電焦集法 (IEF)

3.3.3  二次元電泳

3.3.4  蛋白質轉印法

4   分子量決定法  Molecular Weight Determination

4.1

膠体過濾法  Gel Filtration

4.2

梯度電泳法  Gradient PAGE

4.3

其他分子量測定方法  Other Methods

4.3.1  超高速離心法

4.3.2  由胺基酸序列計算分子量

4.3.3  質譜儀分析

5   蛋白質構造與組成分析  Structure Analysis

5.1

N-端或 C-端胺基酸決定  Terminal Determination

5.2

胺基酸組成分析  Amino Acid Composition

5.3

胺基酸定序法  Amino Acid Sequencing

5.3.1  cDNA 間推法

5.3.2  Edman 直接定序法

5.4

胜汰圖譜  Peptide Mapping

5.4.1  蛋白質的專一性水解

5.4.2  檢定胜太群的方法

5.5

其他相關方法  Other Techniques

5.5.1  分子消光係數

5.5.2  蛋白質分子結構分析

6   免疫學工具的利用  Immunological Tools

6.1

抗原製備  Antigen Preparation

6.2

免疫流程  Immunization Protocol

6.3

抗体製備  Antibody Preparation

6.4

抗体的應用  Application of Ab

7   蛋白質科技  Protein Technology

7.1

蛋白質科技的範疇  Scope

7.2

蛋白質的微量分離及檢定  Microtechniques

7.2.1  微量分離技術

7.2.2  微量分析技術

7.3

蛋白質體研究  Proteomics

7.3.1  由 proteome 推出生物的代謝途徑

7.3.2  從 proteome 找出疾病病變蛋白質

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