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服務說明： |
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本儀器由台灣大學跨院系貴重儀器經費 (2002 年)
所購置，除協助本系或校內各研究室進行相關的蛋白質序列分析之外，若儀器仍有多餘產能，將可提供為校外各研究單位定序服務。
至此，把我們所有的研究服務項目整合起來，已經達到若干年前的一個理想，就是完成整個蛋白質的『純化
- 檢定 - 定序 - 抗體』流程，以支援相關的教學與研究。在『蛋白質體學』正方興起的此時此刻，更具有水到渠成的意義，也正是順應潮流與需求。 |
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儀器型號：
Applied Biosystems,
Procise 492 |
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根基於
Edman degradation 反應的傳統 N-端自動定序儀器。 |
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參考網站：Max
Plank Institute for Molecular Genetics:
Edman Sequencing |
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儀器位置： 台大生命科學院
微生物與生化所
mbc
生化共同儀器室 (Pub
C) |
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如何計費： |
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因為本儀器的消耗品及維護費相當昂貴，因此請使用者共同負擔費用，以便維持儀器的良好操作品質。 |
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請特別注意
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因為定序結果不一定成功，可能樣本太雜，或
N-端被
blocked；雖然無法完成定序，仍須付『基本費用』是我們服務的先決條件。若無法認同這一點，請勿送件。(通常遇到無法定序的樣本，我們都會跑一次標準品，看系統是否有問題，確定系統正常，才會決定是被
blocked)。 |
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經過三年服務之統計，若不計入儀器購置、水電人工等成本，向大家收取的費用，無法支付本儀器的消耗品費用，因此 2007 年起調漲費用如下︰ |
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樣本數目 |
1~2 |
3~5 |
6~9 |
10 以上 |
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基本費用 |
1,800 |
1,700 |
1600 |
1500 |
無論有無定出序列均得繳付 |
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每胺基酸 |
250 |
250 |
250 |
250 |
依最後定出的胺基酸數目計算 |
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收費說明： |
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(1)
數量增加享有折扣優待，是因為較大數量一起處理起來比較方便，因此必須是 同一批送件
才能有折扣，否則仍以單件計價。 |
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(2) 例如只送一件，定出十個胺基酸，則需付費
1,800 + (250 x 10) = 4,300。 |
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(3)
因為我們無法開立發票，因此 將由相關廠商開出所使用試劑或維修費用的發票，由使用者報銷。我們只希望自給自足，沒有營利的計畫。 |
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(4)
因故未能定出序列者，除非是我們操作失誤，也必須收取基本費用。 |
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申請方法： |
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請以
e-mail 提出服務要求，先複製並填妥以下各資料或問題： |
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或者 下載申請書 (MS
Word file) |
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基本資料： (必須回答)
計畫主持人：
姓名 連絡電話 (通常是指導教授)
計畫執行人：
姓名 連絡電話 (通常是研究生、博士後或助理)
樣本總數目：
請注意要同一批送件
樣本的來源：
請分別說明每一個樣本的來源為何
樣本的純度：
請說明如何純化或得到你的樣本
以下這些說明可以幫助我們處理樣本： (選擇性回答)
樣本的處理：
樣本有沒有經過特別的處理 (例如蛋白脢水解片段)
最多循環數：
例如指定最多只要定十個胺基酸
(或沒有限制)
電泳染色片：
電泳片的結果可以幫助我們操作更正確
樣本之定量：
有無蛋白質定量結果
其它注意事項：
要不要快速 e-mail 通知定序結果？ |
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若你的樣本數目很多，也可以使用如下的表格：
(請自行修改格式或內容) |
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樣本名稱 |
樣本來源 |
樣本純度 |
循環數 |
其它說明 |
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1 |
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2 |
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3 |
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4 |
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5 |
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6 |
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7 |
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8 |
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9 |
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10 |
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連 絡 |
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請電郵至：
juang@ntu.edu.tw
電話：(02)3366-4081 賈儒珍
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技術問題請洽：
賈儒珍 (02)3366-4081 |
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樣本郵寄： 台北市羅斯福路四段 台灣大學 農化二館 AC2-520
莊榮輝 收 |
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注意事項： |
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樣本的準備方法：
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(1) 要求三個基本原則：質均、量多、少鹽類。 |
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(2) 原則上只接受
轉印在 PVDF 膜 上的樣本，其它形式樣本請來信洽詢。 |
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參考：轉印
PVDF 膜的操作方法 (酵素化學實驗)。 |
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注意：請一定使用
Millipore 的
PVDF
膜，以免轉印膜溶解掉。 |
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(3) 樣本濃度越高越好，Coomassie Blue
染色要能清楚看到 (1~10
mg)，請自行調整；可集合若干個相同樣本，一起送來定序，結果會較明顯。 |
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參考：如刊頭
二次元電泳圖片 中所標示的蛋白質色點最為理想。 |
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(4) 最好的樣本是由
二次元電泳 轉印所得，若是使用一次元電泳，就要小心有無污染，電泳前儘量以各種色層分析法預先純化。 |
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(5) 樣本中避免使用 Tris
為緩衝液，也要去除任何含有 自由胺基 的添加物。 |
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注意：若因樣本太雜或上述問題導致無法定序，請使用者自行負責。 |
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(6) 若遇到 N-端 blocking
的問題，將馬上通知使用者，以便儘快處理。 |
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對策：若
N-端 blocked 就要以蛋白脢水解，分離出胜汰片段來定序；或可改用 LC-MS-MS 質譜儀分析，則請另覓相關貴儀服務。 |
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注意：很對不起，但
N-端 blocking 也要收取基本費用。 |
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送件排序原則：
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(1) 樣本請以掛號郵寄 上述地址，或者親送
本實驗室。 |
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(2) 依樣本送到的先後順序排隊上機，若前面樣本很多，就要排隊較久。 |
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(3) 在本網頁刊頭處標出最近的
樣本排隊數目，請自斟酌等候時間。 |
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(4) 若有急件須插隊者，請來電洽詢能否安排，急件需提高
基本費用五成。 |
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(5) 我們希望大部分樣本都能夠在一週內完成定序工作。 |
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(6) 目前僅接受 學術單位 委託，尤其是各公私立大學及研究所。 |
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結果報告：
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(1) 將以限時掛號寄上預測的蛋白質序列，以及每一循環的 HPLC
圖譜。 |
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(2) 若需快速通知定序結果，將先以 e-mail
告知序列，同時再郵寄結果。 |
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(3) 因故未能定出序列者，我們將說明理由，並且與使用者洽商對策。 |
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(4)
遇有糾紛
很難免的，當你的序列定不出來，或結果不符合預期時，一定不太高興；此時我們會檢查其他人的定序是否正常，並通知此一事實；若無他人的樣本對照時，我們會跑一次標準品。請記得，你樣本處理越好，定序成功的機率就越大，所得到的序列也會越長。
申訴電話：3366-4448 莊榮輝。 |
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預祝各位 實驗順利、研究成功！ |
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本儀器已加入生命科學院的
TechComm
服務網 |
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