O-3B 營運狀況

由於卓越計畫已經順利完成四年總期限，本核心實驗室也達成階段性任務，停止對外服務。

感謝總主持人林榮耀院士多年來的指導，能有機會參加此一大型計畫，學習歷練成果豐碩。

(L) 本實驗室吳建興博士已經離職，前往元培技術學院任教 (2004)；

(R) 研究助理鄭又華將至本校醫學院生化與分生所就學 (2003)。

『抗體製備』的相關課程，預定每年四月中開課，歡迎同學或助理旁聽。

本課程的最新消息請到相關課程網頁 (2003 年 4 月已完成；2004 年暫停)


O-3B 抗體製備申請：統計至 2004 年申請表
	營運現況		委託單位	抗原名稱實驗操作條件			抗原種類
	實驗編號日期		(● = 卓越子計畫或相關計畫)	[抗原數目]; A 腹水, M 單株, P 傳統, m monospecific Ab, B 抗體庫
	洽談中：
	3B405	2004/06	●醫學院生化所	E protein 2 M
	3B404	2004/06	●醫學院生化所	4A 1 M

	免疫中：		5 案	3 = 免疫次數 T = 效價 (+) ? = 效價低
	3B403	2004/04	●醫學院生化所	3CL protease 2	P		表現蛋白質
	3B402	2004/01	●醫學院生化所	VLP-2 6	M		表現蛋白質
	3B401	2004/01	●醫學院生化所	VLP-1 4	M		表現蛋白質
	3B327	2003/11	○生科院微生所	AT25 ?	m		合成胜肽鏈
	3B329	2003/12	○生科院微生所	KS25 ?	M		合成胜肽鏈

	進行中：		8 案	F Fusion E ELISA S Subcloning A Ascites
	3B314-2	2003/11	○生農院植病系	DTZZM S	M		表現蛋白質
	3B233-2	2003/12	○中研院植物所	VrCRP S	M		抗蟲蛋白質
	3B323	2003/10	○生科院生技系	BoBfruct 2 E	m		表現蛋白質
	3B326	2003/11	○生科院微生所	KS15 S	m		合成胜肽鏈
	3B325	2003/11	●生科院生技系	竹筍水溶性蛋白 E	M		蛋白質體
	3B324	2003/11	○生農院獸醫系	犬淋巴細胞 E	M		整體細胞
	3B321	2003/10	●生科院生技系	Virus A	M		死病毒顆粒
	3B311	2003/04	●生科院生技系	L78, L78-P S	M		合成胜肽鏈

	暫停：		26 案				原因 (請參考)
	3B316	2004/05	□生科院生技系	BoBfruct 3-1			只認胜肽鏈
	3B317	2004/05	□生科院生技系	BoBfruct 3-2			只認胜肽鏈
	3B328	2004/04	□生科院生技系	Trypsin			高同質性
	3B322	2004/04	□醫學院生化物所	SARS 表現蛋白			抗原中斷
	3B319	2004/04	□醫學院微生物所	Esm-1			抗原中斷
	3B307-2	2004/01	□醫學院微生物所	Esm-1			抗原量不足
	3B320-2	2004/01	□生科院生技系	Trypsin (porcine)			免疫時間短
	3B315	2004/01	□生科院生技系	SARSC			合成胜肽鏈
	3B318	2004/01	□生科院生技系	Patulin			小分子毒素
	3B314	2003/05	□生農院植病系	DTZZM			抗原太複雜	說明
	3B310	2003/04	□生科院生技系	BoBfruct 2-2			免疫效價差	說明
	3B306	2003/04	□生科院生技系	BoBfruct 2-1			免疫效價差	說明
	3B304	2003/03	□生科院生技系	BoBfruct 1			免疫效價差	說明
	3B312	2003/05	□農學院農化系	Putalin			抗原製備問題
	3B239	2002/11	□農學院植病系	QEM11			只認合成胜肽
	3B301	2003/04	□農學院植病系	ECM14			抗原同質性高
	3B238	2003/02	□理學院動物系	CH12B			抗原同質性高
	3B237	2002/10	□理學院動物系	SMIFA			抗原同質性高
	3B230	2002/08	□農學院農化系	L78			細胞污染
	3B216	2002/02	□理學院動物系	RR2			同質性蛋白質
	3B210	2002/06	□醫學院微生物所	NSSA			蛋白表現問題
	3B209	2002/05	□農學院農化系	SPPK			酵素純度不佳
	3B112	2002/03	□農學院農化系	Monacolin			溶解度不佳
	3B108	2001/09	□農學院農化系	蛋白質酵素			抗原有誤
	3B104	2001/01	□醫學院生理所	PIP₂			抗原性極弱
	3B105	2001/03	□理學院植物系	植物蛋白質			抗原量不足

	★ 已完成：		62 案	成果 = 細胞株↓			成果 =	抗體 /	論文
	3B309	2004/01	★生科院生技系	竹筍水不溶性蛋白	B		抽取蛋白質	bank
	3B241	2004/01	★生科院生技系	竹筍總蛋白	B		抽取蛋白質	bank
	3B308	2003/04	☆生科院生技系	PAL	P		植物蛋白質	33
	3B303	2003/10	☆農學院農化系	DG20021209-4	m		合成胜肽鏈	5
	3B313	2003/09	☆台南師院	大豆蛋白質	P		抽取蛋白質	21
	3B307	2003/09	☆醫學院微生物所	Esm-1	P M		表現蛋白質	10
	3B305	2003/07	★醫學院生化所	HB4C	P		表現蛋白質	10
	3B302	2003/04	☆農學院農化系	DG20021209-3	m		合成胜肽鏈	9	●
	3B233	2003/04	☆中研院植物所	抗蟲蛋白	M	1 株	表現蛋白質	7
	3B242	2003/04	★理學院動物系	M intracellular	P		表現蛋白質	16	●
	3B235	2003/03	★農學院農化系	PCS	M	1 株	合成胜肽鏈	3	●
	3B234	2003/03	★農學院農化系	SPPK	M	1 株	純化蛋白質	5
	3B229	2003/03	☆中研院生化所	PrP51-92	m		合成胜肽鏈	10
	3B243	2002/11	★理學院動物系	M extracellular	P		合成胜肽鏈	9
	3B240	2002/11	★理學院動物系	Psr	P		表現蛋白質	7
	3B232	2002/11	☆農學院農化系	OSK1	P		表現蛋白質	10	●
	3B236	2002/09	★農學院農化系	SP	P		純化蛋白質	5
	3B219	2002/09	☆中研院植物所	C21	M	4 株	合成胜肽鏈
	3B205	2002/09	☆農學院農化系	水稻 SS (S2, D3)	M m		合成胜肽鏈	30
	3B117B	2002/09	☆農學院農化系	水稻 Rsus	M	凍藏	表現蛋白質
	3B106B	2002/09	☆理學院植物系	超氧岐化脢	M	4 株	表現蛋白質
	3B206	2002/09	★理學院動物系	NPKII	M	3 株	病毒表現蛋白
	3B231	2002/06	★理學院動物系	CM9	P		表現蛋白質	20
	3B227	2002/06	★理學院動物系	ORF1-N	P		表現蛋白質	1
	3B226	2002/06	★理學院動物系	DNApol	P		表現蛋白質	2
	3B225	2002/06	☆中研院生化所	S135-GlcNAc	m		合成胜肽鏈	12
	3B215	2002/06	★理學院動物系	NPKIIFL	M		表現蛋白質	20
	3B228	2002/05	★理學院動物系	GST-M9	P		表現蛋白質	20
	3B207	2002/05	☆農學院農化系	SPS	P		表現蛋白質	28
	3B202	2002/05	★理學院動物系	Cu	P		病毒蛋白質體	28
	3B214	2002/05	☆中研院植物所	N20	M	2 株	合成胜肽鏈	30
	3B213b	2002/05	☆中研院植物所	P20	M	2 株	表現蛋白質	30
	3B113	2002/05	★理學院動物系	ICP	P		病毒蛋白質	8
	3B224	2002/05	☆農學院植病系	Chitinase	P		表現蛋白質	23
	3B223	2002/05	☆中醫學院營養系	BE	P		綠豆酵素	15
	3B222	2002/05	☆農學院獸醫系	動物細胞抗原	M	自篩	膜蛋白抗原
	3B218	2002/05	☆理學院植物系	YNM16	m		合成胜肽鏈	56
	3B217	2002/05	☆理學院漁科所	SDM24	m		合成胜肽鏈	28
	3B212	2002/05	☆農學院農化系	L-RSP-L80	m		合成胜肽鏈	38
	3B211	2002/05	☆農學院農化系	H-RSP-SB	m		合成胜肽鏈	66
	3B208	2002/05	★醫學院生化所	BAT3-C300	M	1 株	電泳蛋白質	26
	3B221	2002/04	★農學院農化系	SP	P		甘藷酵素	22	●
	3B220	2002/04	★理學院動物系	500	M		表現蛋白質	27
	3B204	2002/04	☆農學院農化系	水稻 SS (T1, TP1)	m M		合成胜肽鏈	45
	3B201	2002/04	★理學院動物系	Ab4	M	1 株	表現蛋白質	14
	3B118	2002/03	☆農學院農化系	植物激素受體	M	1 株	表現蛋白質	20
	3B116	2002/03	★理學院動物系	細胞膜蛋白	m		合成胜肽鏈	36
	3B213	2002/03	☆中研院植物所	P20	P		表現蛋白質	20
	3B203	2002/03	★理學院動物系	C2	P		表現蛋白質	22
	3B114	2002/02	★醫學院生化所	毒蛋白 AOP-1	M	1 株	表現蛋白質	20	●●
	3B117A	2002/02	☆農學院農化系	水稻 Rsus	P		表現蛋白質	32
	3B115B	2002/01	★理學院動物系	C12C	P		表現蛋白質	55
	3B107	2002/01	☆理學院植物系	MSOD-1	M	1 株	合成胜肽鏈	22
	3B115A	2001/12	★理學院動物系	C12N	P		表現蛋白質	46
	3B109	2001/12	☆理學院漁科所	魚類蛋白 Zmyf-5	M	1 株	表現蛋白質	18
	3B106A	2001/12	☆理學院植物系	超氧岐化脢	P		表現蛋白質	8
	3B111	2001/11	★農學院農化系	酵素 SP (H7c)	A		cell line 腹水	16	●
	3B110	2001/10	★醫學院生化所	病毒蛋白質	A		cell line 腹水	15
	3B103	2001/09	★農學院農化系	Citrinin 紅麴毒素	M	4 株	小分子		●
	3B102	2001/08	☆農學院園藝系	植物蛋白質激脢	M	5 株	表現蛋白質
	3B101	2001/07	★農學院農化系	PC 合成脢 PCS	M	4 株	酵母菌酵素		●
	3B001	2000	★醫學院生化所	過敏原蛋白質	M	2 株	表現蛋白質	mL	●
			(★ = 卓越子計畫及相關計畫)	A 腹水, M 單株, P 傳統, m monospecific Ab, B 抗體庫
	目前成果：			● = 正式論文			● = 學位論文
	服務期間： 2001/6/1 ~ 2004/04			目前服務總案數： 101			共完成 62 案	案數
	M 單株抗體：細胞株 cell lines			每案得到一株以上			39 株	24
	單株抗體：腹水 ascites fluid			由上述單株抗體所製備			> 195 mL
	PA 傳統抗體：腹水 ascites fluid			包括傳統及 monospecific Ab m			875 mL	38
	B 抗體庫： Proteomic antibody bank			整個蛋白質體誘生總抗體			2	2
	● 正式論文			SCI / non-SCI			8 / 0 篇	8
	● 學位論文			博士 / 碩士			4 / 4 篇	8
				若有發表論文請告知！

經過數個月的努力改進，發現可能真的是 NS-1 細胞突變了。當我們重新取出十年前所冰凍的 NS-1 細胞，幾次實驗後發現以前的問題大多不再發生。但為了防範問題再度出現，我們同時也開始使用 SP 細胞株作為融合對象，希望能夠完全解決此問題。

最近我們的抗體系統出了一些問題，可能是 NS-1 細胞株傳遞太久了。

雖然細胞融合的結果非常好，而且也可以測得到抗體，但若把細胞打散分到大培養皿後，細胞就開始出現長不好的現象；接著把融合細胞打入小鼠腹腔製造腹水，其效價就會變得很差。另外，利用腹水方式來製備傳統抗血清者，都很難得到高效價的腹水，雖然試採血的抗血清中確實有效價。總合起來，動物免疫沒問題，細胞融合也很正常，問題可能出在 NS-1 細胞，該株細胞已被傳遞無數世代，可能產生變異。因此我們從液態氮中取出十年前冰凍的 NS-1，重新培養，希望能解決此一難題。目前還在測試中。


追求卓越儀器室	生化共同儀器室 Pub 導覽｜回首頁
O-2D-1 FPLC：	計畫內容儀器說明使用申請
*O-2D-2* AB 492：	服務說明如何計費申請方法注意事項
O-3B Ab：	計畫目標實驗室說明使用申請表格工作進度目前成果結果統計

	已發表論文
1	Shih SF, Wu YH, Hung CH, Yang HY, Ling JY (2001) Abrin triggers cell death by inactivating a thiol-specific antioxidant protein. J Biol Chem 276: 21870~21877	SCI
2	Chen HM, Chang SC, Wu CC, Cuo TS, Wu JS, Juang RH (2002) The catalytic behavior of L-form starch phosphorylase from sweet potato roots is regulated by proteolysis. Physiol Plantarum 114: 506~515.	SCI
3	Chen WL, Hung DJ, Liu PH, Wang HL, Su JC, Lee PD (2001) Purification and characterization of sucrose phosphate synthase from sweet potato tuberous roots. Bot Bull Acad Sin 42:123~129	SCI
4	Tsai ZC, Wang AY (2003) Identification of rice manganese-dependent protein kinases that phosphorylate sucrose synthase at multiple serine residues. Bot Bull Acad Sin 44: 141~150	SCI
5	Wang X, Wu YC, Fadok V, Lee M, Gengyo-Ando K, Cheng L, Ledwich D, Hsu P, Chen J, Chou B, Henson P, Mitani S, Xue D (2003) Cell corpse engulfment mediated by C. elegans phosphatidylserine receptor through CED-5 and CED-12. Science 302:1563~1566	SCI
6	Young GH, Chen HM, Lin CT, Tseng KC, Wu JS, Juang RH (2006) Site-specific phosphorylation of L-form starch phosphorylase by a protein kinase activity from sweet potato roots. Planta 223(3): 468~478 (PubMed)	SCI
7	Wu YJ, Chen HM, Wu DJ, Wu JS, Chu RM, Juang RH (2006) Preparation of monoclonal antibody bank against whole water-soluble proteins from rapid-growing bamboo shoots. Proteomics* 6(22): 5898~5902 (PubMed)	SCI
8	Huang JG, Lee CL, Lin HM, Chuang TL, Wang WS, Juang RH, Wang CH, Lee CK, Lin SM, Lin CW (2006) A miniaturized germanium-doped silicon dioxide-based surface plasmon resonance waveguide sensor for immunoassay detection. Biosens Bioelectron 22(4): 519-525 (PubMed)	SCI
9		SCI
	雖然卓越計畫的任務已經終止，但若有相關論文發表，仍然請註明貢獻，並通知本實驗室。
	Acknowledgement 請註明 Program for Promoting Academic Excellence of Universities (O-3B Lab)
	請依上述例子將出版論文以 e-mail 寄到 juang@ntu.edu.tw (感謝不盡)