追求卓越儀器室

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O-2D-1  FPLC：

O-2D-2  AB 492：

O-3B Ab：

O-2D  蛋白質純化實驗室計畫內容：

計畫摘要  計畫概述  計畫目標  互動關係  實施方法

傳統的蛋白質純化經常無法達致均質，通常初步分離後，再以管柱層析法進行各步驟的純化工作，最後必須以製備式電泳或高效能層析法進行均質純化。 本分項計畫 (O-2D Lab) 的功能，即在對各研究室所得到的部分純化酵素，進行精密分離，以獲得純質蛋白質。所得到的純質蛋白質，可以繼續進行微量分析與檢定，得到最終的有用資訊；也可進行 抗體製備，得到專一性極高的探測工具。 因此，本分項計畫是屬於承先啟後，關鍵性的一步，在研究工作上極為有用。

過去五十年來分子生物學方面的蓬勃研究，發現了種種基因，以及其表現與調節等重要功能；加上近來風行的染色體定序解碼，未來將是研究核酸序列的時代，而核酸序列則更要轉譯成蛋白質才具有功能。 因此，有關研究整體蛋白質的 proteomics，也將是生命科學的主流。 無論是整個蛋白質體的探討，或是對單一蛋白質的研究，分離純化出均質蛋白質都是極為重要且基本的事。

本分項計畫 O-2D 主要是要提供蛋白質純化的工具，使得蛋白質的純化能夠快速而有效；因此將以 FPLC 配合各種管柱，進行各子計畫所委託蛋白質的精密純化工作。所得到的均質蛋白質，將可配合 O-2B Lab 的 微量分析，進行分子量、胺基酸序列等分析，以快速檢定蛋白質的種類。 更可以進行 抗體的製備，獲得專一性抗血清，或者以細胞融合技術得到單株抗體。以上各項成果，都將對研究進展有很大的幫助。

(1) 協助各子計畫進行蛋白質的初步分離。  

(2) 執行該蛋白質的精密純化。

(3) 配合 O-2B Lab 進行蛋白質的精密分析。

(4) 發揮本儀器的最大服務效能。

本計畫 (O-2D) 的特色，在於聯繫上游的蛋白質表現產物 (卓越計畫的各子計畫)，以及下游的蛋白質微量分析 (O-2B) 與抗體製備 (O-3B)，使得整個蛋白質相關的研究，能夠連成一線，形成一個完整的支援系統。 (參考下圖)

實施方法

一、服務對象︰

(1) 本卓越計畫的各子計畫優先，農化系生化研究室各研究工作次之，其他校內研究計畫再次之。

(2) 每位使用者請以『上午、下午、夜間』為單位預先登記。

(3) 請先填妥申請表，傳真至『蛋白質純化實驗室』 2363-1704。

二、核心實驗室功能的經營方式︰

(1) 第一次使用者先填申請表，經過儀器室負責人審定具有使用能力後，自行上機使用。不會使用者，必須先由儀器室負責人教導，學會正確使用方法。

(2) 第二次使用請找儀器室負責人在場；第三次以後，自行依規定登記使用。

(3) 經常使用者要自備管柱，所有緩衝液等試劑，請在自己的研究室準備妥當。

三、品質管制︰

(1) 整體將以『使用登記本』為主要管考依據，必要的話可發出評鑑表，請使用者評鑑之；並請使用者在發表論文時，於致謝欄說明本核心實驗室之貢獻。 本計畫英文名稱：Program for Promoting Academic Excellence of Universities (O-3B Lab)。

(2) 各項目的管考，另有檢查重點如下︰

     (a) 使用次數；(b) 使用頻率；(c) 維修頻率 (將與 Pharmacia 簽維修合約)。

四、使用者事項︰

(1) 操作者最好修過蛋白質或 酵素純化 相關實驗課程者。

(2) 一般研究生或助理在受過基本訓練後，均可自行使用。

(3) 請參考上面第二項 (經營方式)，以及本網站之公佈。

(4) 樣本蛋白質經過初步純化後，才能進入本儀器；至少要以硫酸銨分劃出總蛋白質，最好再經過一或二支 層析管柱。

五、經費分攤方式︰

(1) FPLC 將備有一套公用管柱，但經常使用者請自備，其他材料費請自理。

(2) 若因使用者失誤而造成儀器受損，其維修費用由使用者負擔。

(3) 每案收取使用費 1,000 元，以支付共同維修或消耗品費用。

(4) 本儀器已經開始服務，請多利用。

O-2D 蛋白質純化實驗室 FPLC 儀器說明：

儀器圖片

本核心實驗室所使用的 FPLC 新舊機型 (編號 81 及 83)。

儀器位置  農化二館 AC2-517C

本核心實驗室在 農化二館 五樓 AC2-517 室。

使用原則  (詳情請看上面 實施方法)

(使用費暫定 1,000 元，將視實際需要再做調整) 

O-2D 蛋白質純化實驗室 FPLC 使用申請表：  

申請者可以列印下表，填妥後傳真至『抗體製備實驗室』 2363-1704。

或者下載 本表格檔案，填妥後傳真或 e-mail 至 juang@ccms.ntu.edu.tw。

相關技術問題可先電話洽詢 3366-4448 (莊榮輝)。

如何直接列印上表：

(1) 點選上表可以連結至單張表格 (2) 直接由該檔案圖面列印 (3) 列印完成再退回本頁

下載 使用申請表及使用說明 (MS Word 2000 file: 2Dform.doc)

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