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酵素化學實驗 B3 酵素操作方法 1 分析 2 純化 3 電泳 4 轉印 | ||
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目 錄 |
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| 流程圖 |
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B3 酵素操作方法的內容，大部分取自陳翰民博士論文 (1997) 中的方法一章，並加修改以便適合本課程之用。同學可以參考操作方法內的各種實驗技術，但若有必要也可以更動之。 |
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1.1 蛋白質定量法 193 |
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1.1.1 Bradford 定量法 193 |
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1.1.2 BCA 定量法 194 |
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1.2 澱粉磷解脢活性分析 195 |
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1.3 澱粉磷解脢動力學分析 196 |
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2.1 粗抽取及硫酸銨分劃 199 |
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表 2.1 各百分飽和濃度硫酸銨添加量 200 |
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2.2 膠體過濾法 200 |
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2.3 離子交換法 202 |
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2.4 製備式電泳與電泳溶離 203 |
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3.1 不連續膠體電泳 (native-PAGE) 205 |
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表 3.1 常用 native-PAGE 膠體溶液 206 |
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3.2 SDS 膠體電泳 207 |
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表 3.2 常用 SDS-PAGE 膠體溶液 208 |
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3.3 梯度膠體電泳 209 |
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3.4 等電焦集法 210 |
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3.5 膠體染色法 212 |
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3.5.1 Coomassie Brilliant Blue R (CBR) 染色法 212 |
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3.5.2 硝酸銀染色法 212 |
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3.5.3 醣蛋白質染色法 (過碘酸-硝酸銀法) 214 |
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3.5.4 澱粉磷解脢活性染色法 215 |
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3.6 膠片乾燥法 216 |
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4 蛋白質電泳轉印及相關應用 217 |
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4.1 蛋白質電泳轉印法 217 |
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4.2 酵素免疫染色 218 |
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4.3 蛋白質 N-端序列決定法 220 |
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