生物技術方法  卷一

▼ 生物技術核心實驗  BCT 

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Biotechnology Core Techniques

　回目錄   
　 　 　
附 錄  預定課程表 ． 實驗器材表 ． 撰寫實驗報告

　 Contents ． Chapter 0 ． Chapter 1 ． Chapter 2 ． Chapter 3 ． Chapter 4 ． Appendix 　  
　 Appendix   Schedule ． Utilities ． Report 　
     課程表
     

  

Schedule

 　
　

  預定課程表

次

日期

講習課程 Lecture Course

實驗課程 Lab Course

 DNA

1

 

DNA in general

D1) Micropipetting

D2) Spectrophotometry

D3) Bacterial culture techniques (I)

D4) Restriction analysis of DNA (I)

2

 

Cloning strategies

D5) Mini-prep of plasmid DNA

D6) Restriction analysis (II)

D7) Large scale digestion of plasmid

3

 

Isolation and quantitative analysis of DNA

D8) Isolation of DNA fragment

D9) Quantitative analysis of DNA

D10) DNA ligation

4

 

Transformation and identification of transformants

D11) Bacterial culture techniques (II)

D12) Transformation

5

 

Protein expression systems

D13) Colony hybridization

D14) Histochemical detection

6

 

Detection of specific nucleic acid sequences by hybridization

D15) Mini-prep of plasmid DNA (II)

D16) Restriction analysis (III)

D17) Southern blotting

 

 RNA

7

 

RNA in general

RNA preparation

R1) Total RNA preparation from

R2) in vitro transcription

8

 

Denaturing gel electrophoresis

Northern hybridization analysis

R3) Preparation of probes by random priming

R4) Agarose-formaldehyde gel electrophoresis of RNA

R5) Northern blot setup

9

 

Probe preparation

R6) Preparation of probes by PCR

R7) Northern/Southern hybridization

10

 

Analysis of RNA by primer extension, S1 analysis, RNase protection and nuclear run-off

R8) Detection of DIG-labeled probes by enzyme immunoassay

R9) Analysis of the blot

 

 Protein

11

 

Protein in general

Protein extraction

Gel filtration chromatography

P1) Crude extraction of fractionation

P2) Column packing and Gel filtration

12

 

Ion exchange chromatography

Protein assay

P3) Protein & enzyme activity assay

P4) Ion exchange chromatography

13

 

Affinity chromatography

P5) Affinity chromatography

P6) Protein & enzyme activity assay

14

 

Polyacrylamide electrophoresis

Protein transfer

P5) SDS-PAGE

P6) Protein transfer

15

 

Immunological tools

P7) Immunostaining

P8) Molecular weight determination

　
　

本實驗課程的所有操作，可分為十五次實驗，在一學期中可以完成；若在暑假中密集上課，則約需時四週。上表是本校所規劃的預定課程表，各不同班次的實際進度可能會有變動。

 　
　

　

 　
　 　 　
　

　
　 　 　

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　組產表

  　回目錄   

  

List of Lab Utilities

 　
　 　 　
　 實驗儀器及各組器材表  本表列出本實驗課所需的大小儀器及各組器材 　
　

 儀 器

 實驗桌面

分配方式

名  稱

數量

check

每

組

一

個

電泳槽 Mupid II

1

 

冰桶

1

 

定量瓶

1

 

漏斗

1

 

量筒

1

 

燒杯

3+1

 

震盪器 Vortex

1

 

管柱

1

 

鐵架

1+3

 

收集器

1

 

電泳槽 Mighty Small

1

 

多

組

一

個

桌上離心機 (單數組)

1/2

 

加熱攪拌器 (雙數組)

1/2

 

分光光度計 (第二組)

1/4

 

小烏龜離心機 (第三組)

1/4

 

轉印槽 Transphor (第一組)

1/4

 

供電器

1/2

 

 公用儀器

公

用

桌

看片箱

3

 

水浴

4+2

 

微波爐

1

 

ELISA reader

1

 

離心濃縮機 SpeedVac

1

 

暗

室

DNA Cross-linker

1

 

震盪培養箱

1

 

UV illuminator + 相機

1

 

高速離心機

1

 

無菌操作台

1

 

準

備

室

天平 (0.00)

4

 

天平 (0.000)

3

 

pH 酸鹼度計

2

 

純水機 Millipore

1

 

製冰機

1

 

冷凍櫃 -20℃

1

 

 消耗品用具

 組產表

分配方式

名  稱

數量

check

請

小

心

保

管

組

產

，

結

業

後

如

數

交

還

自動吸管Autopipet

3

 

吸管盒

2+2

 

馬克筆

2

 

標籤色帶

1

 

計時器

1

 

微量試管架

1+1

 

微量試管盒

桌上

 

離心管

2

 

剪刀

1

 

刀片 (小心勿割傷)

1

 

刀柄

1

 

玻璃缸組

1

 

玻璃棒

1

 

接種環

1

 

浮船

1

 

酒精燈

1

 

藥匙

1

 

鑷子

2

 

VSWP 濾膜

1

 

攪拌子

1

 

針頭

1

 

打火機

1

 

蛋白質零件盒

1

 

 其他公用物品 實驗室公用桌

公

用

桌

膠膜 Parafilm

 

 

鋁箔

 

 

保鮮膜 Saran wrap

 

 

手套

 

 

各種公用溶液

 

 

 

 

 

 

 

 

自

取

小垃圾罐

 

 

洗瓶

 

 

 

 

 

 

 

 

　
　

　

 　
　 　 　
　

　
　 　 　

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　報告

  　回目錄   

  

Writing a Report

 　
　 　 　
　

 如何撰寫實驗報告

 　
　 　 　
　

通 則：

 　
　

實驗報告是 完全根據你自己的實驗歷程撰寫的，因此除了小部份引用他人的文獻之外，都必須是實際的實驗過程與結果的記錄。 報告的長短與成績並不一定成正比，實在而有創見的一句話，比起千百行空話要有價值。 每個人要寫自己的報告，膠片等影像結果可用掃描或彩色影印附上；儘可能使用電腦及文書處理軟體。

 　
　

報告的結構：

 　
　

雖然以下大略描述一般報告的構造與寫法，但報告或論文的格式並無一定規格，只要寫得合理、正確、一致，均為好的論文報告。 事實上只要隨手翻開一本科學期刊，參照裡面論文的格式，用心來寫報告，也可以有相當好的成果。

　
　

Cover and Content:

 　
　

第一頁為封面及目錄，上半頁依序寫入 實驗課編號、題目、組別、作者、交出日期等訊息；下半頁要整裡出一張目錄表，詳細標出各項內容的頁碼。

 　

　

Introduction:

 　
　

簡單描述實驗的動機與目標，請用 自己的話 說出來，不要直接抄襲。 若需要引用他人文獻，請小心註明出處。

 　
　

Materials and Methods:

 　
　

請寫出 你自己的 實驗步驟，完全記錄下你所操作的流程與條件，而非講義或論文上所載者。 這部份最容易過度抄襲，若完全遵照已知報告或論文中的方法，請加註出處即可，不要原文照抄一次，那沒有任何意義。

 　
　

Results:

 　
　

條理分明地寫出你的結果，老實陳述觀察所得結果。 實驗數據要經過整理後，作成圖表以利判讀；不要將原始資料原封抄錄。 若重複嘗試過多次實驗，請去蕪存菁，只寫出有意義的實驗結果，以免空佔篇幅；但切勿遺漏重要結果。

 　
　

Discussion:

 　
　

由結果所得到的觀察，進一步整合分析，說明由結果所透露出來的信息。 若有與事實或已知不符的現象，請仔細討論或解釋之；此部份最需發揮專業背景實力。

 　
　

References:

 　
　

報告中若有引用他人結果者，一定要列入參考文獻。 編輯參考文獻要多下苦功，切勿因為文獻不容易查或不好打字而隨便交差。 參考文獻的寫法相當複雜，不同期刊有不同格式，請選定一種寫法；可參考使用 Plant Physiology 上的格式。

 　
　

Figure and Table:

 　

　

圖表一定要精確製作，正確而易懂的圖表，最有助於研究結果的判讀。 所有圖表都要依序編號，並且加註說明文字；好的圖表自己會說話，讀者只要研讀單獨的圖表即可瞭解實驗結果。 雖然沒有嚴格規定，但使用電腦軟體作圖已成為必要，SigmaPlot 為最常用且必備者。 作圖方法的最佳範本都在現成的期刊上，多參考別人如何安排圖表內容，是最佳的學習方式。

 　
　 　 　
　

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■ 最近修訂日期︰ 2004/03/23